Identificação de atividade deteriorante e do gene apr na microbiota isolada de leite cru em Caxias, MA
DOI:
https://doi.org/10.14295/2238-6416.v74i4.707Palavras-chave:
proteolítico, lipolítico, sacarolítico, psicrotrófico.Resumo
Dentre as bactérias contaminantes, as psicrotróficas destacam-se como as principais responsáveis pela deterioração do leite, pois são capazes de se multiplicar em temperaturas de refrigeração. O gene apr carreia a informação para a produção da metaloprotease alcalina, uma enzima termoresistente capaz de degradar as proteínas do leite. Objetivou-se investigar, por meio de métodos biomoleculares, a presença do gene apr e o potencial deteriorante de bactérias proteolíticas isoladas do leite cru em uma microrregião do Maranhão. Foram selecionadas 112 amostras de leite cru, coletadas de fevereiro a junho de 2018 em propriedades leiteiras das microrregiões de São João do Sóter e Caxias, MA. As análises microbiológicas foram realizadas no Instituto Federal do Maranhão (IFMA), Campus Caxias, e os ensaios biomoleculares no Laboratório de Inspeção de Produtos de Origem Animal (LIPOA) da Universidade Estadual de Londrina (UEL). Foram realizados testes para classificação de proteólise, lipólise e potencial acidificante em temperatura ótima (36 °C/2 dias) e atividade psicrotrófica (7 °C/10 dias). Foram achados 10 (9%) isolados positivos para o gene apr, todos pertencentes ao gênero Pseudomonas, corroborando com outras pesquisas no estado que apontam para o grande potencial deteriorante das bactérias encontradas na localidade. Desta forma, assim como em outras regiões do Brasil, o leite cru refrigerado produzido no estado do Maranhão precisa ser obtido de forma higiênica evitando contaminação com microrganismos deteriorantes que possam comprometer a integridade e a qualidade do leite fluido e derivados destinados ao comércio.
Referências
ANDREANI, N. A. et al. Characterization of the thermostable protease AprX in strains of Pseudomonas fluorescens and impact on the shelf-life of dairy products: Preliminary results. Italian Journal of Food Safety, v. 5, n. 6175, p. 239-244, 2016.
BACH, J. H. et al. PCR primers and functional probes for amplification and detection of bacterial genes for extracelular peptidases in single strains and in soli. Journal of Microbiological Methods, v. 44, p. 173-182, 2001.
BAGLINIÈRE, F. et al. Quantitative and qualitative variability of the caseinolytic potential of different strains of Pseudomonas fluorescens: Implications for the stability of casein micelles of UHT milks during their storage. Food Chemistry, v. 135, n. 4, p. 2593-2603, 2012.
BEERENS, H., LUQUET, F.M. Guía practico para el análisis microbiológico de la leche y los productos lácteos. Zaragoza: Editorial Acríbia. 1990. 141 p.
BELOTI, V. Leite: Obtenção, inspeção e qualidade. Londrina: Editora Planta, 2015.
BEZERRA, A. S. et al. Comportamento da produção e dos preços de leite bovino no estado do Maranhão. Nucleus Animalium, v. 9, n. 1, p. 97-108, 2017.
BRASIL. Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento. Instrução Normativa nº 76, de 26 de novembro de 2018. Regulamentos Técnicos que fixam a identidade e as características de qualidade que devem apresentar o leite cru refrigerado, o leite pasteurizado e o leite pasteurizado tipo A. Diário Oficial da União: seção 1, Brasília, DF, n. 230, p. 9, 30 nov. 2018.
BRASIL, R. B. et al. Estrutura e estabilidade das micelas de caseína do leite bovino. Ciência Animal, v. 25, n. 2, p. 71-80, 2015.
CARVALHO et al. Nota de conjuntura: Leite e derivados - Maio de 2019. Juiz de Fora: Embrapa Gado de Leite, maio. 2019.Disponível em: https://www.embrapa.br/busca-de-publicacoes/-/publicacao/1109189/nota-de-conjuntura-leite-e-derivados---maio-de-2019
COSTA, W. A.; VANETTI, M. C. D.; PUSCHAMANN, R. Biocontrole de Listeria monocytogenes por Pediococcus acidilactici em couve minimamente processada. Ciência e Tecnologia de Alimentos, v. 29, n. 4, p. 785-792, 2009.
COUSIN, M. A. Presence and activity of psychrotrophic microorganisms in milk and dairy products: A review. Journal of Food Protection, v. 45, n. 2, p. 172-207, 1982.
D'INCECCO, P. et al. Bacterial proteolysis of casein leading to UHT milk gelation: An applicative study. Food Chemistry, v. 292, p. 217-226, 2019.
DOWNES, F. P.; ITO, K. (ed.). Compendium of methods for the microbiological examination of foods. 4th ed. Washington: AMERICAN PUBLIC HEALTH ASSOCIATION – APHA, 2001.
EMBRAPA - EMPRESA BRASILEIRA DE PESQUISA AGROPECUÁRIA. Balde Cheio. 2019. Disponível em: https://www.embrapa.br/balde-cheio
HAHNE, J. et al. The contribution of fast growing, psychrotrophic microorganisms on biodiversity of refrigerated raw cow's milk with high bacterial counts and their food spoilage potential. Food Microbiology, v. 79, p. 11-19, 2019.
HANTSIS-ZACHAROV, E.; HALPERN, M.; Culturable psychrotrophic bacterial communities in raw milk and their proteolytic and lipolytic traits. Applied and Environmental Microbiology, v. 73, p. 7162-7168, 2007.
HÉBRAUD, M.; POTIER, P. Cold shock response and low temperature adaptation in psychrotrophic bacteria. Journal of Molecular Microbiology and Biotechnology, v. 1, n. 2, p. 211-219, 1999.
KABLE, M. E. et al. Viable and total bacterial populations undergo equipment-and time-dependent shifts during milk processing. Applied and Environmental Microbiology, v. 85, n. 13, p. e00270-19, 2019.
LEMOS, K. L. Caracterização dos principais micro-organismos deteriorantes e perfil genético de bactérias aeróbicas formadoras de esporos isoladas de leite cru bovino produzido no estado do Maranhão – Brasil. 2016. Tese (Doutorado em Ciência Animal) – Universidade Estadual de Londrina, Londrina, 2016.
LIMA, J. B. A. Caracterização genética de bactérias proteolíticas e lipolíticas autóctones do leite cru no Maranhão-Brasil. 2016. Tese (Doutorado em Ciência Animal) – Universidade Estadual de Londrina, Londrina, 2016.
LIMA NETO E. C. Quantificação de micro-organismos e classificação de sua atividade enzimática proteolítica e lipolítica em leite cru captado em laticínios no município de Piumhi- MG. 2018. Monografia (Graduação em Medicina Veterinária) – Centro Universitário de Formiga, Formiga, 2018.
LINS NETO, O. T. A. et al. Qualidade do leite in natura produzido e comercializado no município de Timon no estado do Maranhão. Nucleus, v. 13, n. 2, p. 41A-47A, 2016.
MACHADO, S. G. et al. The biodiversity of the microbiota producing heat-resistant enzymes responsible for spoilage in processed bovine milk and dairy products. Frontiers in Microbiology, v. 8, p. 302, 2017.
MAGRI, L. P. Quantificação de acidez titulável e pH utilizando técnica potenciométrica como indicador de qualidade do leite bovino. 2015. Dissertação (Mestrado em Ciência e Tecnologia em Leite e Derivados) – Universidade Federal de Juiz de Fora, Juiz de Fora, 2015.
MARQUES, A. V. L. et al. Investigação da qualidade microbiológica de amostras de leite cru produzidos na fazenda experimental do instituto de ciências agrárias da Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG). Revista de Educação Continuada em Medicina Veterinária e Zootecnia do CRMV-SP, v. 14, n. 3, p. 91-91, 2016.
MENG, L. et al. Characterization of Pseudomonas spp. and associated proteolytic properties in raw milk stored at low temperatures. Frontiers in Microbiology, v. 8, p. 2158, 2017. DOI: 10.3389/fmicb.2017.02158
NASCIMENTO, E. R. Avaliação do teor de gordura e acidez em leite UHT desnatado comercializado em Campina Grande - PB. 2014. Trabalho de Conclusão de Curso (Química Industrial) – Universidade Estadual da Paraíba, Campina Grande, 2014.
NEUBECK, M. V. et al. Biodiversity of refrigerated raw milk microbiota and their enzymatic spoilage potential. International Journal of Food Microbiology, v. 211, p. 57-65, 2015.
PEREIRA, N. S. Determinação da presença de bactérias psicrotróficas no leite cru produzido em região do interior do Rio Grande do Sul e sua correlação com o índice de acidez. 2017. Trabalho de Conclusão de Curso (Bacharelado em Farmácia) – Centro Universitário Univates, Lajeado, 2017.
PINTO, C. L. O. et al. Identificação de bactérias psicrotróficas proteolíticas isoladas de leite cru refrigerado e caracterização do seu potencial deteriorador. Revista do Instituto de Laticínios Cândido Tostes, v. 70, n. 2, p. 105-116. 2015.
R DEVELOPMENT CORE TEAM. R: a language and environment for statistical computing. Vienna: R Foundation for Statistical Computing, 2012. Disponível em: http://www.rproject.org
RIBEIRO JÚNIOR, J. C. et al. Efficiency of boiling and four other methods for genomic DNA extraction of deteriorating spore-forming bacteria from milk. Semina: Ciências Agrárias, v. 37, n. 5, p. 3069-3078, 2016.
RIBEIRO JÚNIOR, J. C. et al. The main spoilage-related psychrotrophic bacteria in refrigerated raw milk. Journal of Dairy Science, v. 101, n. 1, p. 75-83, 2018.
SÁ, S. A. C. A. et al. Avaliação das condições de aeração do pré-inóculo utilizado no cultivo de bactérias ácido láticas (BAL) em meio líquido. The Journal of Engineering and Exact Sciences, v. 3, n. 6, p. 0841-0845, 2017.
SANTOS, G. B.; CARVALHO, G. R. Autocorrelação espacial e clusters na produção brasileira de leite. In: WORKSHOP DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA DA EMBRAPA GADO DE LEITE, 23., 2019, Juiz de Fora. Anais [...]. Juiz de Fora: Embrapa Gado de Leite, 2019.
SCATAMBURLO, T. M. et al. Spoilage potential of Pseudomonas species isolated from goat milk. Journal of Dairy Science, v. 98, n. 2, p. 759-764, 2015.
SILVA, F. G. et al. Microbiota psicrotrófica deteriorante proteolítica e lipolítica do leite cru da região de Castro-PR. Revista de Ciência Veterinária e Saúde Pública, v. 3, p. 63-65, 2016.
SILVA, Z. F. et al. Características do sistema de produção de leite da Microrregião de Imperatriz, no Estado do Maranhão. Amazonian Journal of Agricultural and Enviromental Sciences, v. 55, n. 2, p. 92-97, 2012.
SPINA, T. L. B. et al. A microbiota láctea: Importância na cadeia laticinista x deterioração. Pubvet, v. 4, p. Art. 865-871, 2010.
TEIDER JÚNIOR, P. et al. Pseudomonas spp. and other psychrotrophic microorganisms in formal and informal Brazilian Minas Frescal cheese: Proteolytic, lipolytic and AprX production potential. Journal of Dairy Science. v. 101, n. 3, p. 1- 30. 2018.
VITHANAGE, N. R. et al. Comparison of identification systems for psychrotrophic bacteria isolated from raw bovine milk. International Journal of Food Microbiology, v. 189, p. 26-38, 2014.
YAMAZI, A. K. Caracterização da atividade e do potencial proteolítico de Pseudomonas spp. isolados de leite de cabra. Dissertação (Mestrado em Medicina Veterinária) – Universidade Federal de Viçosa, Viçosa, 2012.
YAMAZI, A. K. et al. Práticas de produção aplicadas no controle de contaminação microbiana na produção de leite cru. Bioscience Journal, v. 26, n. 4, 2010.
YUAN, L. et al. Spoilage potential of psychrotrophic bacteria isolated from raw milk and the thermo-stability of their enzymes. Journal of Zhejiang University-Science B, v. 19, n. 8, p. 630-642, 2018.
ZENI, M. P. et al. Influência dos microrganismos psicrotróficos sobre a qualidade do leite
refrigerado para produção de UHT. Unoesc & Ciência ACET, v. 4, n. 1, p. 61-70, 2013.
ZHANG, C. et al. Destabilization of UHT milk by protease AprX from Pseudomonas fluorescens and plasmin. Food Chemistry, v. 263, p. 127-134, 2018.
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