Bactérias do ácido lático potencialmente probióticas isoladas de leite não pasteurizado
DOI:
https://doi.org/10.14295/2238-6416.v75i3.820Palavras-chave:
análise filogenética, microbiota, Lactobacillus.Resumo
Algumas Bactérias do Ácido Lático (BAL), quando ingeridas em quantidades adequadas, são capazes de impactar positivamente o hospedeiro, sendo consideradas probióticas. Para serem utilizadas, essas bactérias devem ter sua identidade conhecida e apresentar características específicas. Nesse estudo, BAL foram isoladas a partir de amostras de leite não pasteurizado e caracterizadas in vitro quanto ao potencial probiótico. Após isolamento, as colônias foram analisadas por coloração de Gram e teste de catalase; DNA total foi extraído e o rDNA 16S foi amplificado e sequenciado. Análise filogenética foi realizada para reconstrução da história evolutiva dos isolados. Os isolados foram avaliados quanto à resistência ao pH ácido e à presença de sais biliares. A atividade antagonista das bactérias isoladas foi avaliada utilizando teste de sobrecamada e o perfil de suscetibilidade a antimicrobianos foi realizado pelo método de disco difusão. Do total de 13 bactérias isoladas, três foram caracterizadas como bastonetes Gram-positivos e catalase negativos, apresentando 99% de identidade com Lactobacillus casei, Lactobacillus paracasei e Weisella paramesenteroides. Os isolados apresentaram resistência in vitro ao estresse ácido e à presença de sais biliares; mostraram perfil de resistência semelhante aos antimicrobianos e capacidade de inibir o crescimento de bactérias potencialmente patogênicas, como Staphylococcus saprophitycus, Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis e Enterococcus faecium. Diante das características comprovadas, as bactérias láticas isoladas neste trabalho apresentam potencial probiótico.
Referências
ALVIM, L. B. Identificação molecular e seleção de bactérias láticas com potencial probiótico isoladas de diferentes mucosas de suínos. 2011. 66 f. Dissertação (Mestrado em Genética) – Universidade Federal de Minas Gerais, Belo Horizonte, 2011.
BOOTH, P. B. et al. Selective depression of blood group antigens associated with hereditary ovalocytosis among Melanesians. Vox sanguinis, v. 32, n. 2, p. 99-110, 1977. DOI: 10.1111/j.1423-0410.1977.tb00612.x
CARVALHO, P. T. et al. Análises de bactérias ácidos láticas, de pH e acidez em amostras de leites fermentados comercializados no município de Sete Lagoas-MG. Brazilian Journal of Food Research, v. 8, n. 3, p.12-21, 2017. DOI: 10.3895/rebrapa.v8n3.3989
CHARTERIS, A. et al. Antibiotic susceptibility of potentially probiotic Lactobacillus Specie. Journal of Food Protection, v. 61, n. 12, p. 1636-1643, 1998. DOI: 10.4315/0362-028x-61.12.1636
CLSI - Clinical and Laboratory Standards Institute. M100-S26: Performance standards for antimicrobial susceptibility testing. 26. ed. Wayne: CLSI, 2017. 256 p.
COPPOLA, R.; TURNES, C. Probióticos e resposta imune. Ciência Rural, v. 34, n. 4, p.1297-1303, 2004. DOI: 10.1590/s0103-84782004000400056
CRUZ, G. B. V. et al. Prospecção tecnológica de micro-organismos probióticos com atividade imunomoduladora. Cadernos de Prospecção, v. 8, n. 4, p. 684-690, 2015. DOI: 10.9771/s.cprosp.2015.008.076
ERKKILÄ, S.; PETÄJÄ, E. Screening of commercial meat starter culture at low pH and in presence of bile salts for potential probiotic use. Meat Science, v. 55, n. 3, p. 297-300, 2000. DOI: 10.1016/S0309-1740(99)00156-4
FAO - Food and Agriculture Organization of the United Nations; WHO - World Health Organization. Health and nutritional properties of probiotics in food including powder milk with live lactic acid bacteria. Report of a Joint FAO/WHO Expert Consultation on evaluation of health and nutritional properties of probiotics in food including powder milk with live lactic acid bacteria. Córdoba: FAO; WHO, 2001. 34 p. Disponível em: http://www.fao.org/tempref/docrep/fao/meeting/009/y6398e.pdf
FERREIRA, C. L. L. F. Grupo de bactérias lácticas e aplicação tecnológica de bactérias probióticas. In: FERREIRA, C. L. L. F. (ed.). Prebióticos e Probióticos: atualização e prospecção. 1. ed. Rio de Janeiro: Editora Rubio, 2012. cap. 1. p. 1-28.
FUSCO, V. et al. The genus Weissella: taxonomy, ecology and biotechnological potential. Frontiers in Microbiology, v. 6, p. 1-22, 2015. DOI: 10.3389/fmicb.2015.00155
GUIMARÃES, F. et al. Seleção de bactérias láticas com potencial probiótico provenientes do leite de transição bovino fermentado. Interciência, v. 43, n. 2, p. 132-136, 2018.
KANT, R.; PALVA, A.; OSSOWSKI, I. An in silico pan-genomic probe for the molecular traits behind Lactobacillus ruminis gut autochthony. Plos One, v. 12, n. 4, p. 1-26, 2017. DOI: 10.1371/journal.pone.0175541
LECLERCQ, S. et al. Low-dose penicillin in early life induces long-term changes in murine gut microbiota, brain cytokines and behavior. Nature Communications, v. 8, n. 15062, p. 1-12, 2017. DOI: 10.1038/ncomms15062
MANGONI, J. et al. Potencial probiotic lactobacilli of pig origin. Acta Scientiarum-Animal Sciences, v. 33, n. 3, p. 267-272, 2011. DOI: 10.4025/actascianimsci.v33i3.9826
MONTORO, D. T. et al. A revised airway epithelial hierarchy includes CFTR-expressing ionocytes. Nature, v. 560, n. 7718, p. 319-324, 2018. DOI: 10.1038/s41586-018-0393-7
OLIVEIRA, G. L. V. et al. Intestinal dysbiosis and probiotic applications in autoimune diseases. Immunology, v. 152, n. 1, p. 1-12, 2017. DOI: 10.1111/imm.12765
OLIVEIRA, S. D. et. al. Detection and identification of Salmonella from poultry-related samples by PCR. Veterinary Microbiology, v. 87, n. 1, p. 25-35, 2002. DOI: 10.1016/s0378-1135(02)00028-7
OUOBA, L. I. I.; LEI, V.; JENSEN, L. B. Resistance of potential probiotic lactic acid bacteria and bifidobacteria of African and European origin to antimicrobials: Determination and transferability of the resistance genes to other bacteria. International Journal of Food Microbiology, v. 121, n. 2, p. 217-224, 2008. DOI: 10.1016/j.ijfoodmicro.2007.11.018
PASSOS, M. C. F.; MORAES-FILHO, J. P. Intestinal microbiota in digestive diseases. Arquivos de Gastroenterologia, v. 54, n. 3, p. 255-262, 2017. DOI: 10.1590/s0004-2803.201700000-31
PENNACCHIA, C. et. al. Selection of Lactobacillus strains from fermented sausages for their potential use as probiotics. Meat Science, v. 67, n. 2, p. 309-317, 2004. DOI: 10.1016/j.meatsci.2003.11.003
PINTO, R. M. S. P. Efeito metabólico e dos probióticos, na microbiota intestinal, na prevenção do cancro do colo-rectal. 2017. 18 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação em Nutrição) – Faculdade de Ciência da Nutrição e Alimentação da Universidade do Porto, Porto, 2017.
POSADA, D.; BUCKEY T. R. Model selection and model averaging in phylogenetics: advantages of AKAIKE information criterion and Bayesian approaches over likelihood ratio tests. Systematic Biology, v. 53, n. 5, p. 793-808, 2004. DOI: 10.1080/10635150490522304
RODRIGUEZ-ALONSO, P. et al. Antibiotic resistance in Lactic Acid Bacteria and Micrococcaceae/Staphylococcaceae isolates from artesanal raw milk cheeses, and potential implications on cheese making. Journal of Food Science, v. 74, n. 6, p. 284-293, 2009. DOI: 10.1111/j.1750-3841.2009.01217.x
SANSCHAGRIN, S.; YERGEAU, E. Next-generation sequencing of 16S ribosomal RNA gene amplicons. Journal of Visualized Experiments, v. 90, n. 51709, p. 1-6, 2014. DOI: 10.3791/51709
SILVA, J. G. Identificação molecular de bactérias ácido láticas e propriedades probióticas in vitro de Lactobacillus spp. isolados de queijo Minas artesanal de Araxá, Minas Gerais. 2016. 82 f. Dissertação (Mestrado em Tecnologia e Inspeção de Produtos de Origem Animal) – Escola de Veterinária da Universidade Federal de Minas Gerais, Belo Horizonte, 2016.
SUÁREZ, J. E. Microbiota autóctona, probióticos y prebióticos. Nutrición Hospitalaria, v. 31, n. supl. 1, p. 3-9, 2015. DOI: 10.3305/nh.2015.31.sup1.8701
SUZUKI, M.; RAPPÉ, M. S.; GIOVANNONI, S. J. Kinetic bias in estimates of coastal picoplankton community structure obtained by measurements of small-subunit rRNA gene PCR amplicon length heterogeneity. Applied and Environmental Microbiology, v. 64, n. 11, p. 4522-4529, 1998.
VENTURA, M.; TURRONI, F.; VAN SINDEREN, D. Probiogenomics as a tool to obtain genetic insights into adaptation of probiotic bacteria to the human gut. Bioengineered Bugs, v. 3, n. 2, p. 73-79, 2012. DOI: 10.4161/bbug.18540
WENDLING, L. K.; WESCHENFELDER, S. Probióticos e alimentos lácteos fermentados – uma revisão. Revista do Instituto de Laticínios Cândido Tostes, v. 68, n. 395, p. 49-57, 2013. DOI: 10.5935/2238-6416.20130048
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